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人肝星形細胞LX2也稱為liemingXu-2,是一個永生的細胞。細胞培養(yǎng)是細胞生物學(xué)乃至整個生命科學(xué)研究和生物工程中的一項基本實驗技術(shù)。動物細胞培養(yǎng)為疫苗的生產(chǎn),開發(fā)以及腫瘤的預(yù)防和治療提供了一種新的方法。今天,我們總結(jié)了它的培養(yǎng)指南給你,你可要認真學(xué)好了。
體外培養(yǎng)的細胞可分為原代細胞和傳代細胞。原代細胞是指人體取出后立即培養(yǎng)的細胞。有人稱代細胞和十代內(nèi)的細胞為原代細胞培養(yǎng),而在體外培養(yǎng)條件下適于連續(xù)繼代培養(yǎng)的細胞稱為代細胞。分散的細胞懸液在培養(yǎng)瓶中迅速粘附在瓶壁上,這稱為細胞粘附。一旦細胞附著在壁上,它們便迅速散開并開始有絲分裂,并逐漸形成致密的細胞單層,稱為單層細胞培養(yǎng)。
對于粘附的人肝星形細胞LX2,可以使用以下方法進行傳代:
1.丟棄培養(yǎng)上清液,并用不含鈣和鎂離子的PBS潤濕細胞1-2次。
2.在培養(yǎng)瓶中加入2ml消化液,并在37℃的培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘。然后觀察II型肺泡上皮細胞的消化|細胞在顯微鏡下。如果大多數(shù)細胞變成圓形并脫落,請迅速將其帶回手術(shù)臺,輕按培養(yǎng)瓶幾次,并添加少量培養(yǎng)基以停止消化。
3.添加6-8毫升/瓶培養(yǎng)基,輕輕拍打,然后將其吸出。以1000rpm離心4分鐘,棄去上清液,加入1-2ml培養(yǎng)基,然后充分吹掃。
4.按照1:2到1:5的比例將細胞懸液分成裝有8ml培養(yǎng)基的新板或瓶。
對于懸浮人肝星形細胞LX2,可以將以下方法用于傳代培養(yǎng):
方法1:收集細胞,并以1000rpm離心4分鐘。棄去上清液,并加入1-2ml培養(yǎng)基。將細胞懸液按照1:2至1:5的比例分成含有8ml培養(yǎng)基的新板或瓶。
方法2:可以更改一半的介質(zhì)。丟棄一半培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸浮。將細胞懸液按照1∶2至1∶3的比例分成含有8ml培養(yǎng)基的新板或瓶。