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人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y是一種常用的神經(jīng)元樣細(xì)胞系,廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)和藥理學(xué)研究中。這些細(xì)胞來源于兒茶酚能神經(jīng)系統(tǒng)中的腫瘤組織,并具有類似原代人類交感神經(jīng)節(jié)或中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)前列腺素E受體表達(dá)的功能。
包括兩種類型的細(xì)胞,主要的是小的神經(jīng)母細(xì)胞樣的細(xì)胞,另一種是大的透明成纖維細(xì)胞。細(xì)胞提交到ATCC時(shí)已經(jīng)傳到第36代。已經(jīng)證明細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)到80代以上。
細(xì)胞中的黑點(diǎn),是經(jīng)常有的事情,并不是細(xì)胞不夠好,也不是滅菌技術(shù)部過關(guān),有些是細(xì)胞本身帶的,環(huán)境有的,還有人身上帶進(jìn)細(xì)胞間的,還有就是血清和培養(yǎng)基,主要分以下幾種情況:
1、如果人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y小黑點(diǎn)有增殖趨勢,則有可能是細(xì)菌、真菌或支原體污染,需要處理。
2、如果小黑點(diǎn)沒有增殖趨勢,且不影響細(xì)胞生長,也不影響實(shí)驗(yàn)的話,則可能有以下情況:
?。?)是“黑膠蟲”,
?。?)是核糖體,也可能是雜質(zhì)3)是細(xì)胞碎片,或血清中的里德沉淀析出,在做布朗運(yùn)動。
處理人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y細(xì)胞黑點(diǎn)的一些好的意見:
換好一點(diǎn)的血清;如果是貼壁細(xì)胞的話,可用無菌的PBS洗幾次,可一定程度上緩解。若是懸浮的話,就不太好處理,可以向其中少加一點(diǎn)滋養(yǎng)細(xì)胞(從小鼠腹腔內(nèi)取的巨噬細(xì)胞,這種細(xì)胞不分裂,過一陣就死掉了,)。
加滋養(yǎng)細(xì)胞對有黑膠蟲的剛復(fù)蘇的細(xì)胞很有效!還有就是實(shí)驗(yàn)環(huán)境要注意好,保持細(xì)胞間整個環(huán)境的潔凈度;
換用進(jìn)口的一次性塑料培養(yǎng)瓶;建議清理無菌室所有物品,在換液前先加入生理鹽水并輕輕拍打,沖洗干凈后再加入培養(yǎng)液,堅(jiān)持天天洗,傳代時(shí)加生理鹽水再離心一次,接種密度稍大一些,一段時(shí)間后,蟲子就會大大減少,對細(xì)胞的生長也不會有大的影響;有材料具有一定的作用,可以和換液結(jié)合起來使用。
SH-SY5Y 細(xì)胞在以下領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用:
1、神經(jīng)退行性疾?。簩εcAlzheimer's和Parkinson's等重要的老年性的反應(yīng)模型進(jìn)行基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)方面 大量使用該類型 的類型
2、藥物篩選:SH-SY5Y細(xì)胞性質(zhì)適合評估許多化合物對CNS運(yùn)動、認(rèn)知及情感相關(guān)處理之影響。因此,它們被視為開發(fā)抑郁和焦慮治療方法等新藥物的關(guān)鍵工具。
3、分子生物學(xué)以及遺傳學(xué):作為易于操縱并進(jìn)行基因編輯(CRISPR/Cas9) 的均衡器,SH-SY5Y及其改進(jìn)品種可幫助我們設(shè)計(jì)解決特定催化劑機(jī)制問題所需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件。